Wirtualne laboratorium (WL‑I)
Przeprowadź doświadczenie w laboratorium. Rozwiąż problem badawczy i zweryfikuj hipotezę. W formularzu zapisz wyniki i wnioski.
Temat: Sporządzanie i analiza kariotypu cebuli zwyczajnej (Allium cepa)
Problem naukowy: Z ilu chromosomów i jakiego typu składa się kariotyp cebuli zwyczajnej (Allium cepa)?
Hipoteza: Kariotyp cebuli zwyczajnej (Allium cepa) złożony jest z 10 chromosomów metacentrycznych.
Sprzęt laboratoryjny:
pipety;
szalki Petriego;
mikroskop.
Materiały i odczynniki:
cebula
1 M kwas chlorowodorowy (HCl)
substancja stymulująca podziały komórkowe
kolchicyna
barwnik acetokarmina
Instrukcja wykonania doświadczenia:
Odetnij fragment cebuli, umieść go na szalce Petriego i wytraw ściany komórkowe za pomocą 1 M HCl.
Przenieś komórki na nową szalkę i dodaj substancję stymulującą podziały komórkowe.
Przenieś komórki na nową szalkę i dodaj kolchicynę.
Przenieś komórki na szalkę z roztworem hipotonicznym i zalej barwnikiem.
Obserwuj komórki pod mikroskopem i zrób zdjęcie chromosomów.
Dopasuj chromosomy w pary, żeby utworzyć kariotyp.
Zasób interaktywny dostępny pod adresem https://zpe.gov.pl/a/D1FUAwTRN
Laboratorium 1
Przeprowadzono doświadczenie.
Temat: Sporządzanie i analiza kariotypu cebuli zwyczajnej (Allium cepa)
Problem naukowy: Z ilu chromosomów i jakiego typu składa się kariotyp cebuli zwyczajnej?
Hipoteza: Kariotyp cebuli zwyczajnej (Allium cepa) złożony jest z 10 chromosomów metacentrycznych.
Sprzęt laboratoryjny: probówki, skalpel, mikroskop, szalki Petriego, zlewka.
Materiały i odczynniki: cebula, 1 M kwas chlorowodorowy HCl, substancja stymulująca podziały komórkowe, kolchicyna, barwnik acetokarmina.
Instrukcja wykonania doświadczenia:
1. Odcięto fragment cebuli, umieszczono go na szalce Petriego i wytrawiono ściany komórkowe za pomocą 1 M HCl.
2. Przeniesiono komórki na nową szalkę i dodano substancję stymulującą podziały komórkowe.
3. Przeniesiono komórki na nową szalkę i dodano kolchicynę.
4. Przeniesiono komórki na szalkę z roztworem hipotonicznym i zalano barwnikiem.
5. Obserwowano komórki pod mikroskopem i zrobiono zdjęcie chromosomów.
6. Dopasowano chromosomy w pary, żeby utworzyć kariotyp.
Szczegóły doświadczenia 1.
Kwas chlorowodorowy jest stosowany do perforacji ścian komórkowych, aby odczynniki wykorzystywane w kolejnych krokach procedury kariotypowania mogły wniknąć do komórek.
Szczegóły doświadczenia 2.
Kolchicyna jest alkaloidem pozyskiwanym z nasion ziemowitu jesiennego (Colchicum autumnale). Wiążąc się z tubuliną, uniemożliwia powstawanie wrzeciona podziałowego, przez co blokuje przebieg cyklu komórkowego w metafazie.
Szczegóły doświadczenia 3.
Acetokarmina jest barwnikiem używanym do wybarwiania kwasów nukleinowych, ponieważ wiąże się specyficznie z DNA, jednocześnie nie zabarwiając cytoplazmy. Ponadto jest mniej toksyczna oraz tańsza niż inne barwniki wykorzystywane do barwienia materiału genetycznego.
Wyniki:
Cebula zwyczajna (Allium cepa) ma 8 par chromosomów, w tym 4 pary chromosomów metacentrycznych, 3 pary chromosomów submetacentrycznych oraz 1 parę chromosomów akrocentrycznych.
Wnioski:
Kariotyp cebuli zwyczajnej złożony jest z 16 chromosomów, które różnią się od siebie budową i lokalizacją centromeru.
Weryfikacja hipotezy:
Hipoteza okazała się błędna.