Zapoznaj się z opisem doświadczenia przeprowadzonego w laboratorium biologicznym. Rozwiąż problem badawczy, w formularzu zapisz wyniki, a następnie sformułuj wnioski i zweryfikuj hipotezę.

Określenie aktywności enzymów lizosomalnych w zależności od pH środowiska

Instrukcja wykonania doświadczenia

1.   Należy umieścić probówki w statywie i podpisz je markerem. W trzech probówkach będą przygotowywanie mieszaniny inkubacyjne, podpisane: M 5,5; M 6,5 i M 7,5, a w pozostałych trzech przeprowadzone zostaną poprowadzisz próby, więc należy je podpisać: P 5,5; P 6,6 i P 7,5.

2.   Do trzech probówek podpisanych P 5,5; P 6,5 i P 7,5 odmierza się i wlewa po 0,5 ml płynu Lugola.

3.   Do pustych probówek podpisanych M 5,5; M 6,5 i M 7,5 wlewa się po 2 ml buforu. Do pierwszej bufor o pH = 5,5, do drugiej bufor o pH = 6,5, do trzeciej bufor o pH = 7,5.

4.   Do każdej z trzech probówek podpisanych M 5,5; M 6,5 i M 7,5 dodaje się 2 ml roztworu skrobi.

5.   Do probówek M 5,5; M 6,5 i M 7,5 przenosi się po 0,2 ml śliny i miesza.

6.   Szybko przenosi się 0,2 ml mieszaniny inkubacyjnej z probówki M 5,5 do probówki P 5,5, zawierającej płyn Lugola.

7.   Następnie przenosi się taką samą objętość mieszaniny inkubacyjnej z probówki M 6,5 do probówki P 6,5 oraz mieszaniny inkubacyjnej z probówki M 7,5 do probówki P 7,5.

8.   Włącza się stoper i obserwuje zabarwienia prób. Następnie zapisuje, po jakim czasie zniknie granatowe zabarwienie w poszczególnych probówkach.

Wyniki: Niebieskie zabarwienie zanikło najszybciej w probówce z pH 6,5 – po ok. 2,5 minuty. W pozostałych probówkach zabarwienie zanika znacznie później, po około 8 minutach.